This review discusses microalgae assimilation of C, N and P as affected by pH-dependent factors (solubility, ionization state and bioavailability) and CO2 enrichment in tertiary water treatment during microalgae biomass production. This study indicates the importance of monitoring critical conditions such as: 1) pH and inorganic carbon species interaction; 2) P bioavailability; 3) nitrogen removal through NH3 volatilization and 4) NH3 toxicity. Also, optimal CO2 enriched air considerations, such as: 1) combining intermittent and variable CO2 enrichment to avoid losses into the atmosphere; 2) preventing microalgae growth inhibition due to H2CO3 formation and pH acidification at early stages of the culture and 3) maintenance of optimal pH (≈ 8.5) through the buffer system (CO2 / HCO3_). Finally, we suggest that biological technologies based on microalgae culture to remove excessive nutrient loads and compliance with environmental laws from water, represent a viable alternative attached to recycling and revaluation of resources through the generation and potential uses of biomass (e.g., fertilizer, pigments and antioxidants).

Esta revisión analiza la asimilación de C, N y P por microalgas y la influencia de los factores dependientes del pH (solubilidad, estado de ionización y biodisponibilidad), así como la adición de CO2 y su interacción en el tratamiento terciario de aguas municipales durante la producción de biomasa de microalgas. Este estudio destaca la importancia de monitorizar condiciones críticas como: 1) la interacción entre el pH y las especies de carbono inorgánico; 2) la biodisponibilidad de P; 3) reducción de N por formación de NH3 y 4) toxicidad de NH3. Por otra parte, para el uso óptimo de aire enriquecido con CO2 se recomienda considerar: 1) el suministro intermitente y variable de CO2 para evitar pérdidas a la atmósfera; 2) optimizar el consumo de CO2 evitando la acidificación del pH por formación de H2CO3 e inhibición de las microalgas en etapas tempranas de cultivo; y 3) conservación de pH óptimo (≈ 8,5) a través del sistema de amortiguamiento CO2 / HCO3_. Finalmente, se sugiere que las tecnologías biológicas basadas en el cultivo de microalgas para la eliminación de nutrientes y cumplimiento de normativas ambientales, representan una alternativa viable, que une el reciclaje y revalorización de recursos a través de la generación y usos potenciales de la biomasa (e.g., fertilizantes, pigmentos y antioxidantes).

Somatic embryogenesis can be used for the rescue of threatened forest species. In this research work, the effect of the medium on the germination of Arbutus xalapensis zygotic embryos and 2,4-D growth regulator on induction of embryogenic callus was studied. Strawberry tree fruits were disinfested and the zygotic embryos of seeds were removed and put on MS, WPM and P889 mediums; while for induction of embryogenic callus, they were cultured on MS and WPM. The germination of embryos was affected substantially by culture medium used, being the WPM where 58 % of germination of zygotic embryos was obtained, compared with P889 and MS with 0 and 2 % germination, respectively. Zygotic embryos were placed on MS and WPM medium added with 0, 1, 2, 4 and 8 mg L-1 2,4-D, under light and dark conditions for 30 days. Embryos cultured in MS, and left under low light conditions, had not effect to any treatment to which they were subjected; however, under darkness condition embryogenic callus formation was possible to be induced in the concentration of 1 mg L-1 2,4-D, while on WPM in light condition, the formation and growth of embryogenic callus was achieved by adding 2 mg L-1; under darkness required only 1 mg L-1. Culture medium is essential for the germination of the embryos, the combination of culture medium, the concentration of 2,4-D and the condition of light or darkness are fundamental factors in the induction of embryogenic callus of strawberry tree, required for subsequent studies of micropropagation and cryopreservation of this species.

El objetivo de este trabajo experimental fue estudiar el efecto del medio de cultivo sobre la germinación de embriones cigóticos de madroño y el efecto del 2,4-Diclorofenoxiacético (2,4-D) sobre la inducción de callo embriogénico. Para el primer caso, se extrajeron los embriones cigóticos de las semillas y colocaron en los medios Murashige y Skoog (MS), Woody Planta Medium (WPM) y Pullman 889; para la inducción de callo embriogénico sólo fueron utilizados el MS y WPM adicionados con 0, 1, 2, 4 y 8 mg L-1 de 2,4-D, bajo luz y oscuridad durante 30 días. En el medio WPM se obtuvo un 58 % de germinación, mientras que en el P889 y MS sólo un 0 y 2 % de germinación, respectivamente. Los embriones cultivados en el medio MS en luz no presentaron respuesta alguna en ningún de los tratamiento; sin embargo, en dicho medio pero en oscuridad se logró inducir la formación y crecimiento de callo embriogénico a 1 mg L-1 de 2,4-D, mientras que en el medio WPM en luz se logró con 2 mg L-1; y en oscuridad 1 mg L-1 de 2,4-D. Se concluye que el medio de cultivo es fundamental para la germinación de los embriones y la combinación del medio de cultivo, la concentración del 2,4-D y la condición de luz u oscuridad, son factores fundamentales en la inducción de callos embriogénicos de madroño, requeridos para estudios posteriores de micropropagación y criopreservación de la especie.

Neste trabalho descrevemos a preparação e a caracterização espectroscópica [ressonância paramagnética eletrônica (EPR), espectroscopia UV-Vis e espectroscopia de infravermelho com transformada de Fourier (FTIR)], magnética e espectroeletroquímica do complexo [MnII2(tidf)(OAc)(ClO4)(MeOH)] (tidf = ligante macrocíclico do tipo Robson, obtido pela condensação entre 2,6-diformil-4-metilfenol e 1,3-diaminopropano). O composto [MnII2(tidf)(OAc)(ClO4)(MeOH)] exibe antiferromagnetismo fraco e constante de acoplamento magnético J = -1.59(1) cm-1. A oxidação de [MnII2(tidf)(OAc)(ClO4)(MeOH)] monitorada por experimentos de espectroeletroquímica de UV-Vis e de EPR produziu espécies de valência mista Mn2(II/III) com perfil espectral semelhante ao do complexo [MnII MnIII(tidf)Br3(H2O)2]. Tentativas de cristalização de [MnII2(tidf)(OAc)(ClO4)(MeOH)] produziram o complexo trinuclear de manganês [Mn3III/II/III(tidf)2(µ-OAc)2](ClO4)2. O composto possui duas unidades [MnIII(tidf)]+ onde o íon metálico é pentacoordenado e conectadas a um íon central de MnII hexacoordenado através de pontes µ-fenolato e µ-acetato.

Synthesis, spectroscopic [electron paramagnetic resonance (EPR), UV-Vis and Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR)], magnetic and spectroeletrochemical properties of [MnII2(tidf)(OAc)(ClO4)(MeOH)] (tidf = a Robson type macrocyclic ligand obtained through condensation of 2,6-diformyl-4-methylphenol and 1,3-diaminopropane) are reported. Compound [MnII2(tidf)(OAc)(ClO4)(MeOH)] shows a weak antiferromagnetic behavior with exchange coupling constant J = -1.59(1) cm-1. UV-Vis and EPR spectroelectrochemical response after oxidation of complex [MnII2(tidf)(OAc)(ClO4)(MeOH)] detected the stabilization of mixed-valence Mn2(II/III) species in solution showing spectral features similar to the ones of the isolated mixedvalence [MnII MnIII(tidf)Br3(H2O)2] compound. Crystallization of [MnII2(tidf)(OAc)(ClO4)(MeOH)] surprisingly produced the trimanganese complex [Mn3III/II/III(tidf)2(µ-OAc)2](ClO4)2, not observed in solution. It contains two pentacoordinated [MnIII(tidf)]+ units, each one connected to a central hexacoordinated MnII ion through one µ-phenolate and one µ-acetate bridge.

O objetivo do presente trabalho foi otimizar o procedimento para extração de substâncias húmicas de turfa, utilizando fluxo contínuo, com diferentes extratores (NaOH, KOH e Na4P2O7). A influência do extrator na capacidade de complexação das substâncias húmicas por macro e micronutrientes também foi investigada. Os resultados mostraram que a extração por fluxo contínuo é eficaz, reduzindo o tempo necessário para o passo de extração e, além disso, indicando que as substâncias húmicas apresentaram elevada afinidade para os nutrientes essenciais Ca2+ e Mg2+. Além disso, as maiores capacidades de complexação foram obtidas quando utilizou o extrator Na4P2O7, mostrando não só a eficiência desse composto como agente de extração, mas também a sua aplicação promissora no processo, uma vez que a sua elevada capacidade de complexação permite disponibilizar os nutrientes complexados, bem como diminuir a quantidade de estes nutrientes que podem ser lixiviados, contribuindo, assim, para evitar contaminação do meio ambiente.

The aim of the present work was to optimize a procedure for extraction of humic substances (HS) from peat, using continuous flow with different extractants (NaOH, KOH and Na4P2O7). The influence of extractant on the complexing capacity of humic substances for macro and micronutrients was also investigated. Our results showed that the extraction by flow is efficient, reducing the time required in the extraction step and, furthermore, indicating that the extracted HS have a high affinity for the essential nutrients Ca and Mg. Moreover, an enhanced complexation was achieved by using Na4P2O7, demonstrating not only the efficiency of this compound as extractant, but also its promising application in the process, since its high complexing capacity allows to make available the complexed nutrients as well as diminishing the amount of these nutrients that could be lixiviated, thus contributing to prevent environmental contaminations.

As elevadas concentrações de mercúrio em diferentes matrizes ambientais na Amazônia têm sido atribuídas a atividades mineradoras. Entretanto, altas concentrações de mercúrio também estão presentes no solo e na água em locais como a Bacia do médio Rio Negro, distantes de fontes emissoras antropogênicas. A região Amazônica é caracterizada por dois diferentes regimes sazonais, bem definidos em períodos de cheias e vazantes. O objetivo deste trabalho foi investigar as influências sazonais na interação entre mercúrio e substâncias húmicas aquáticas (AHS), que são os principais complexantes orgânicos naturais. Os resultados obtidos por análise estatística multivariada dos dados mostraram que as substâncias húmicas possuem diferentes características estruturais, dependendo do período sazonal. A capacidade das substâncias húmicas em formar complexos com Hg(II) não está diretamente relacionada ao seu teor de carbono, mas sim natureza e disponibilidade dos grupos funcionais presentes em sua estrutura. Os grupos funcionais carboxílicos e aromáticos estão diretamente relacionados maior capacidade de complexação de AHS por íons mercúrio.

High mercury concentrations in different environmental matrices in the Amazon have been attributed to mining activities. However, high concentrations of mercury are also present in the soil and water in places like in the middle of the Negro River Basin, which is far away from any anthropogenic emission sources. The Amazon region is characterized by two different regional seasons, with well-defined flood and low water periods. The objective of this work was to investigate the seasonal influences of the interaction between mercury and aquatic humic substances (AHS), which are the main agents of the natural organic complexation capacity. The results of the multivariate statistical analysis of the data showed that the humic substances had different structural characteristics, depending on each season. The ability of humic substances to form complexes with Hg(II) is not directly related to their carbon content, but to the nature and availability of the functional groups present in its structure. The functional groups are carboxylic and aromatic directly related to the higher complexation capacity of AHS by mercury ions.

Neste trabalho, substâncias húmicas foram extraídas de amostras de água coletadas mensalmente na Bacia do Rio Negro-AM para estudar suas propriedades no ambiente amazônico e interações com íons mercúrio, considerando a influência da variação sazonal na sua formação. Os parâmetros razões atômicas C/H, C/N e C/O, grupos funcionais, radicais livres do tipo semiquinona, pH, índices pluviométricos e fluviométricos, concentrações de mercúrio foram interpretados por análise hierárquica de cluster (AHC) e análise de componentes principais (ACP). As análises estatísticas mostraram que, quanto maior o índice pluviométrico e menor o índice fluviométrico maior o grau de humificação das substâncias húmicas aquáticas. A seguinte ordem decrescente do grau de humificação das SHA coletadas mensalmente pode ser estabelecida: Nov/02 a Fev/03 > Mar/02 a Mai/02 > Jun/02 a Out/02. As maiores concentrações de mercúrio foram determinadas nas amostras mais humificadas, sugerindo que devido a rearranjos inter e/ou intramoleculares, quanto maior o grau de humificação maior a afinidade dos íons Hg(II) pelas substâncias húmicas aquáticas.

In this work, humic substances were extracted from water samples collected monthly from the Negro River basin in the Amazon state (Brazil) to study their properties in the Amazonian environment and interactions with the mercury ion considering the influence of seasonalness in this formation. The C/H, C/N and C/O atomic ratio parameters, functional groups, concentration of semiquinone-type free radicals, pH, pluviometric and fluviometric indices, and mercury concentrations were interpreted using hierarchical cluster analysis (HCA) and principal component analysis (PCA). The statistical analyses showed that when the pluviometric index was greater and the fluviometric index was smaller, the degree of humification of aquatic substances was greater. The following decreasing order of the degree of humification of the AHS collected monthly was established: Nov/02 to Feb/03 > Mar/02 to May/02 > Jun/02 to Oct/02. The greatest concentrations of mercury were detected in more humidified samples. These results suggest that due to inter and/or intra-molecular rearrangements, the degree of humification of aquatic humic substances is related to its affinity for Hg(II) ions.

Amostras de turfa (SAO e ITA) coletadas no Estado de Sergipe, Brasil, foram caracterizadas por diferentes técnicas: análise térmica e elementar, infravermelho, espectroscopia de ressonância magnética nuclear de 13C (NMR), microscopia eletrônica de varredura (SEM), microscopia eletrônica de varredura ambiental (ESEM), difratometria de raios X (XRD) e comparadas com outras amostras de turfa (SAP) coletadas no Estado de São Paulo, Brasil. As razões mais baixas O/C, E4/E6 e as curvas de análise térmica diferencial (DTA) da amostra de Santo Amaro (SAO) indicaram que esta possui o mais alto grau de decomposição. Resultados da espectroscopia na região do infravermelho mostraram que as amostras de Itabaiana (ITA) e São Paulo (SAP) apresentam pico predominante a 1086 cm-1 atribuídos a presença de Si-O diferente da amostra de Santo Amaro (SAO). Esta mostrou dois picos intensos a 2920 cm-1 e 2850 cm-1 corroborando com dados de RMN 13C e análise termogravimétrica em que houve maior abundância dos grupos C-alquila. A difratometria de raios X (XRD) da amostra de SAO apresentou características de material amorfo. Entretanto, as amostras de SAP e ITA revelam maior presença de quartzo mineral. A microscopia eletrônica de varredura (SEM) e a microscopia eletrônica de varredura ambiental (ESEM) mostraram que a superfície das amostras de turfa possui grânulos porosos de matéria orgânica. As amostras de turfa de ITA e SAP são semelhantes enquanto a de SAO possui alto teor de matéria orgânica. Apenas a amostra de SAO apresenta características de turfa. Os resultados deste estudo mostraram que as amostras são muito diferentes devido aos teores variáveis de material orgânico e inorgânico.

Peat was taken from the Sergipe State, Brazil and characterized by several techniques: elemental and thermal analyses; Fourier infrared (FTIR) and solid state 13C nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopies; scanning electron microscopy (SEM), environmental scanning electron microscopy (ESEM) and X-ray diffractometry (XRD). Also, the Sergipe State peat samples were compared with other peat sample from later from Sao Paulo State, Brazil. The lowest O/C and E4/E6 ratios and differential thermal analysis (DTA) curves of the Santo Amaro (SAO) sample indicated that this sample had the highest degree of decomposition. FTIR results showed that Itabaiana (ITA) and São Paulo (SAP) samples presented more prominent peak at 1086 cm-1 attributed the presence of Si-O than SAO sample spectra. The SAO sample showed two more intense peaks at 2920 cm-1 and 2850 cm-1. These results were corroborated by 13C NMR and thermal gravimetric (TG) where the relative abundance of the alkyl-C groups was greater in the SAO sample. The X-ray diffractometry (XRD) of SAO sample is characteristic of amorphous matter however, the SAP and ITA samples revealed the large presence of quartz mineral. The scanning electron microscopy (SEM) and environmental scanning electron microscopy (ESEM) showed that the surface of peat samples have porous granules of organic material. The ITA and SAP peat samples are alike while SAO peat sample is richer in organic material. Only the SAO sample has truthful characteristics of peat. The results of this study showed that the samples are very different due to variable inorganic and organic material contents.

No presente trabalho foram extraídas substâncias húmicas aquáticas através do uso da resina adsorvente XAD 8, e a fração ácida separada por acidificação. Depois da purificação com resina Hyphan e diálise, os ácidos húmicos aquáticos foram caracterizados por espectroscopia no infravermelho com transformada de Fourier e análise elementar. A influência das concentrações dos ácidos húmicos e eletrólitos, pH e tempo de complexação ácido húmico-metal sobre a conformação estrutural foi investigada através de estudos de espectroscopia UV-Vis, empregando a equação sugerida por Doty e Steiner. Os resultados indicam que a macromolécula flexível do ácido húmico assume uma forma condensada em valores de pH ácidos e alcalinos. Outros fatores favorecendo formas condensadas são tempos de complexação mais longos, e altas concentrações de ácidos húmicos e eletrólitos. Assim, considerando a forte influência dos parâmetros investigados na conformação estrutural da macromolécula húmica, podemos concluir que estudos usando espectroscopia UV/Vis para determinar a concentração, aromaticidade e grau de humificação dos ácidos húmicos aquáticos, requerem condições rigorosamente controladas para garantir uma correta interpretação dos resultados analíticos.

In the present work, aquatic humic substances (HS) were extracted by use of adsorbent XAD 8 and the acid humic fraction (AH) was separated throught acidification. After being purified by Hyphan resin and dialyze, the aquatic AH was characterized using Fourier-transform infrared spectroscopy and elemental analysis. The influence of the aquatic HA and electrolyte concentrations, pH and aquatic AH-metal complexation time on the conformation was investigated using UV/Vis spectroscopic studies, employing the equation suggested by Doty and Steiner. The results indicated that the acid humic flexible macromolecule assumes a condensed form at acid and alkaline pH. Other factors favoring condensed conformations are longer metal complexation time ("ageing") and higher aquatic AH and electrolyte concentrations. Thus considering the strong influence of the investigated parameters in the structural conformation of the humic macromolecule, we conclude that studies using UV/Vis spectroscopy to estimate the concentration, aromaticity, humification degree of the aquatic AH and so on, require rigorous control over the experimental conditions employed to provide a correct interpretation of the analytical results.

A interação entre ácidos fúlvicos aquáticos (AFA) de região tropical com cloro e formação de trihalometanos foi estudada por fluorescência. As substâncias húmicas aquáticas (SHA) foram extraídas de córrego com coloração escura (localizado em uma área de proteção ambiental perto da cidade de Cubatão-SP, Brasil) utilizando resina XAD 8, de acordo com o procedimento recomendado pela Sociedade Internacional de Substâncias Húmicas. As medidas de fotoluminescência foram feitas em espectrômetro Perkin Elmer utilizando-se amostras de AFA tratadas e sem tratamento com cloro em diferentes tempos de reação (1, 24, 48, 72 e 168 h) e concentrações de cloro (2,5; 5,0; 10,0 e 20,0 mg L-1). A intensidade de fluorescência relativa foi significativamente diminuída com o aumento da concentração de cloro e tempo de reação. A redução na intensidade de fluorescência na região de maiores comprimentos de onda foi interpretada como um indicativo da interação entre os grupos aromáticos condensados dos AFA e o cloro.

The interactions of tropical aquatic fulvic acids (AFA) with chlorine and formation of trihalomethanes were characterized by fluorescence spectroscopy. The aquatic humic substances (AHS) were isolated from a dark-brown stream (located in a environmental protection area near Cubatão city in São Paulo State, Brazil) by means of the collector XAD 8 according the procedure recommended by the International Humic Substances Society. The photoluminescence measurements were made by using a Perkin Elmer spectrometer; AHS, aquatic humic acids (AHA) and AFA samples were assayed. The interactions of AFA and chlorine were characterized by using different reaction times (1, 24, 48, 72 and 168 h) and chlorine concentrations (2.5, 5.0, 10.0 and 20.0 mg L-1). The relative fluorescence intensity for AFA was significantly decreased with the increasing of chlorine concentration and reaction time. The reduction of fluorescence intensity in the region of longer wavelength was interpreted as an indicative of interaction between condensed aromatic groups of AFA and chlorine.

ELISAs have been applied to pesticide residue analysis due to their high sensitivity and selectivity. However, some ELISAs performance may be affected by matrix components. In this work, ELISA for carbaryl in water samples was checked for interference by naturally occurring fulvic acids. The results suggested that the high fulvic acid concentration (<FONT FACE=Symbol>ž³</FONT>30 mg L-1) and acidic pH conditions (pH 4.0) interfere with the signal detection decreasing the method sensitivity. A dilution of the samples and adjust to pH 8.0 are appropriate to minimize the matrix interferences in the ELISA method. Good correlation between ELISA and HPLC-DAD results was observed.

Neste estudo investigou-se a complexação do íon mercúrio (II) por substâncias húmicas aquáticas extraídas (utilizando-se resina XAD 8) do Rio Negro - AM - Brasil. Frações lábeis/inertes de complexos de Hg(II)-SH foram caracterizadas por processo de troca iônica usando-se as técnicas em batelada e em coluna e resina Chelite S. Este coletor apresenta coeficientes de distribuição, Kd, em relação a Hg(II) da ordem de 10(4) diminuindo, contudo, em casos de pequenas razões Hg(II)/SH (< 0.1 mig Hg(II)/mg SH). A influência de diferentes parâmetros (razão de Hg(II)/SH, pH, tempo de contato, tempo de complexação) relevantes na complexação de Hg(II) em ambientes aquáticos foi avaliada. A labilidade de Hg(II) em SH dissolvida é influenciada, principalmente, pela razão de massa Hg(II)/SH e pelo tempo de complexação das espécies Hg(II)-SH formadas. Assim, no caso de baixa concentração de Hg(II) em relação à concentração de SH, lentos processos de transformação das espécies Hg(II)-SH recentemente formadas diminuem a labilidade causando recuperações abaixo da porcentagem total de Hg(II) ligado à SH.

The aquatic humic substances (HS) investigated in this study with respect to their binding capability towards mercury(II) were isolated from the river Rio Negro, Amazonas State - Brazil, by means of the adsorbent XAD 8. Labile/inert fractions of inorganic Hg(II) complexes formed with these HS were characterized using an ion-exchange batch and column technique, respectively, based on Chelite S. This collector exhibits high Hg(II) distribution coefficients, Kd, up to the order of 10(4) decreasing, however, in the case of small Hg(II)/HS ratios (< 0.1 mug Hg(II) / mg HS) . The influence of different complexation parameters (ratio of Hg(II)/HS, pH, contact time, complexing time) relevant for Hg(II) binding in aquatic environments was assessed. The Hg(II) lability in dissolved HS is mainly influenced by the mass ratio of Hg(II)/HS and the ageing of Hg(II)-HS species formed. This is particularly obvious in the case of low Hg(II) loading of HS where slow transformation processes of freshly formed Hg(II)-HS species significantly decrease their lability, leading to incomplete recoveries (< 20%) of the total Hg(II) bound to HS.

Neste estudo as frações metálicas, complexadas por substâncias húmicas aquáticas (SH) foram caracterizadas como lábeis/inertes em função do pH, tempo de complexação e concentração de SH. As SH foram extraídas por ultrafiltração e complexadas com íons metálicos bivalentes. Essas frações foram caracterizadas por processo de troca iônica utilizando resina celulósica Hyphan e procedimento em batelada. Os metais foram determinados por espectrometria de absorção atômica. Os resultados mostram diminuição dos coeficientes de distribuição (Kd) na presença de SH e que a labilidade relativa das frações metálicas complexadas pelas SH é influenciada pelo tempo de complexação, pH e concentração de SH. Até cerca de 15 min, a troca iônica entre os metais complexados pela SH e a resina se comporta como reação de 2ª ordem. Após esse período, o processo de troca é mais lento caracterizando uma cinética de 1ª ordem. Os resultados permitem estabelecer a seguinte ordem de labilidade relativa para as frações metálicas complexadas por SH: Pb > Mn > Cd, Ni > Cu.

The purpose of this paper is to characterize the lability/inertness metal fractions complexed by aquatic humic substances (HS) in relation to pH, complexation time, and HS concentration. HS were preconcentrated by ultrafiltration and complexed with bivalent metal ions. These fractions were characterized by ion exchange with the chelating collector cellulose Hyphan by applying batch procedure. The metals were determined by atomic absorption spectrometry. The results show that the distribution coefficients, Kd, decreased with HS presence, and that the relative lability of metal fractions complexed by HS is dependent on variables such as pH, complexation time, and HS concentration. Until c.a. 15 min, the metal change between aquatic HS and ion exchanger occurs following a 2nd order reaction. Afterwards, the remaining metal fraction in the HS reacts following a 1st order reaction. For traces of metal ions bound to dissolved HS, the lability orderPb > Mn > Cd, Ni > Cu is revealed.